組換えDNA
組換えDNAとは
組換えDNAは、2つ以上の供給源、通常は異なる種に由来するDNA断片を有するDNA分子である。
分子クローニングは、組換えDNA方法論の中心的技術であり、そしてある生物から別の生物への遺伝子の移入、すなわち異なる供給源からのDNAの組換えからなる。
組換えDNAテクノロジー
この手順は一般に、治療可能性を有するヒト遺伝子 (例えばインスリン)を単離し、そしてその遺伝子を動物、細菌または酵母細胞に導入することを含む。
制限酵素と呼ばれるタンパク質の使用を通して、ヒトDNAからの個々の遺伝子が単離されそしてプラスミドと呼ばれる同じ酵素で切断されたDNAの小片に挿入される。
次いで、組換えプラスミドは、 形質転換と呼ばれる過程で動物、細菌または酵母細胞に挿入される。
プラスミドにも見られる薬剤耐性遺伝子は、非形質転換細胞から形質転換細胞を選択する。
次いで、選択された単一細胞がクローンの集団を生じさせるであろうクローニングプロセスを通して、純粋な組換え細胞の集団が確立される。
プロセスの終わりに、全ての得られた細胞は挿入されたヒト遺伝子を担持するプラスミドの1コピーを含むと予想される。
遺伝子およびクローニングされた細胞が挿入されると、次いで細胞はヒト遺伝子を発現するように誘導される。
組換えDNA技術の応用
- ヒトインスリン、成長ホルモン、ワクチン、工業用酵素などの有用物質の製造
- 複製および遺伝子発現機構
- 父親研究
- 遺伝的および感染症の診断
- 遺伝子治療
- トランスジェニック
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